处理及保存

处理及保存
1、悬浮细胞样品：把细胞及培养液一起收集到15ml或者50ml离心管中，1500rpm离心3min，弃去上清；加入PBS轻轻吹打，1500rpm离心3min，弃去上清；反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况一般保存1年，建议尽快检测。 

2、贴壁细胞样品： 
    2.1 胰酶消化：用胰酶将细胞消化后，收集到15ml或者50ml离心管中，1500rpm离心3min，弃去上清；加入PBS轻轻吹打，1500rpm离心3min，弃去上清；反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况一般保存1年，建议尽快检测。 
    2.2 细胞刮子收集细胞：对于某些蛋白（即对胰酶比较敏感或者实验特殊要求，如E-Cadherin不易用胰酶消化后进行WB检测），直接用细胞刮子刮下细胞，收集到EP、15ml或者50ml离心管中，1500rpm离心3min，弃去上清；加入PBS轻轻吹打，1500rpm离心3min，弃去上清；反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。在避免冻融的情况一般保存1年，建议尽快检测。 

3、动物组织样品：取下合适的动物或者人的组织样品后用预冷的PBS或者生理盐水漂洗，尽量除尽残留血液，用滤纸把多余PBS吸取干净。把组织分成约50mg大小（依据实验目的需要进行调整），用锡纸分别包装好或者用冻存管装好，于-80度或者液氮中保存。在避免冻融的情况一般保存1年，建议尽快检测。 

4、植物样品：取得待测植物样品后，用蒸馏水把泥土漂洗干净，用滤纸把多余水分吸取干净，分装成合适大小于-80度或者液氮中保存。在避免冻融的情况一般保存1年，建议尽快检测。 

5、细菌样品：细菌培养完成后，10000rpm离心5min收集细菌，加入PBS吹打，10000rpm离心5min，弃去上清；反复3次，弃去上清后于-80度或者液氮冻存待用。 

6、若要检测磷酸化蛋白，请在3个月内进行。长时间保存样品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而检测不到磷酸化条带。 

7、提取胞浆、胞核蛋白的样品应尽量采用新鲜样品，冻存样品提取的胞核蛋白可能会减少。 

8、血液样品（血浆中蛋白）：3000rpm离心20min后收集上清，分装后于-80度或者液氮冻存待用。3个月以内检测。 

9、长距离运送样品时采用干冰或者液氮。 

10、样品的实际需要量请打电话咨询。 


抗体保存及使用 

应严格按照抗体说明书进行保存，避免出现不必要的麻烦。在-20度保存呈液体状态的抗体请不要分装。新购抗体要在2-3月以内进行WB检测等实验，以验证抗体的有效性。一般新购抗体有非特异条带等问题出现，2-3个月内没有反馈给抗体公司，抗体公司将不再受理投诉。