细胞相关实验服务1
栏目:细胞相关实验服务1 发布时间:2019-08-30

细胞转染,稳定细胞系建立及细胞模型

一、服务内容
1、细胞转染和稳定表达细胞株筛选
    通过转染试剂或电穿孔方式等方式,将目的基因导入贴壁细胞或悬浮细胞24-48小时后,目的基因即在细胞内表达。此时为了建立稳定细胞系,可根据不同基因载体中所含的抗性标记,选用相应的药物对靶细胞进行筛选,从而得到稳定表达外源基因的细胞克隆。观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)。
2、针对不同种类细胞使用药物,低氧,压力等外源因素进行刺激等处理,建立相关的细胞模型,从而进行后续的研究工作。

二、样品要求(样品处理及保存见附件)

1、干冰运输:取对数生长期的细胞,消化后低速离心1000rpm,5min收集细胞,加入适量配制好的冻存液后吹打均匀。将细胞分装入冻存管中,标明细胞的名称、细胞代次、冻存时间及操作者;放4℃冰箱30min,-20℃30min到1h,-80℃过液,然后放入液氮罐;细胞数目不少于5×106/ml;
2、常温运输:细胞贴壁覆盖瓶底面积达40%以上时,装满培养液,瓶口用封口膜封好,装入盒子,盒子里用泡沫或棉花塞满,让瓶子固定在盒子中。

三、服务特点
1、针对不同细胞系筛选合适的转染试剂和质粒浓度配比,提高转染效率和蛋白表达量
2、丰富的抗生素筛选经验和单细胞克隆鉴定方法提高实验效率
3、构建的稳定表达细胞株可稳定传代,极少发生性状丢失

四、客户提供材料
1、待克隆基因和载体信息,待敲低基因信息和shRNA序列信息(如无相关shRNA序列信息,本公司可代为设计并收取相关费用);
2、待转染细胞株(如需使用常用肿瘤细胞株,如293/293T、HeLa等可由本公司提供);
3、阳性对照样品(尽量提供)
4、相关文献(可选)

五、提交给客户结果
1、构建完成的载体和甘油菌株;
2、完整测序报告和序列碱基图
3、载体真核表达鉴定结果
4、载体真核表达蛋白
5、稳定表达细胞株>1×107
6、稳定敲低细胞株>1×107
7、完整实验报告(包括基因扩增图,细胞株过表达和敲低检测结果图等)

 

细胞功能学检测

一、服务内容
1、Transwell检测
2、细胞划痕检测
3、细胞增殖/抑制曲线
4、细胞生长曲线
5、细胞凋亡检测
6、细胞活力检测
7、细胞凋亡/自噬模型
8、细胞增殖模型
9、订制细胞模型 
二、样品要求(样品处理及保存见附件)
1、待检测细胞系及培养条件等信息(本公司可免费提供常见人和小鼠细胞系,如HeLa、293T、3T3等)
2、实验相关药物必须达到分析纯(特殊药物也可以使用化学纯),且来源可靠。
三、服务特点
1、可根据不同实验目的帮助客户选择最优实验方法
2、根据不同细胞系建立相关的研究模型

四、客户提供材料
1、待检测或处理的细胞株
2、细胞处理相关药物或特殊试剂
3、相关文献(可选)
五、提交给客户结果
1、相应的数据结果、图片和分析结果
2、建立相应模型的细胞株
3、完整实验报告


原代细胞分离培养
一、服务内容
1、原代细胞分离培养
2、原代干细胞培养
二、样品要求(样品处理及保存见附件)
1、干冰运输:新鲜的组织或细胞块离体后-80℃保存,并用干冰尽快送至本公司实验室;
2、实验动物运输:实验动物(如小鼠、大鼠或兔)用合适的运输笼装好后快递或送至本公司实验室;
三、服务特点
1、拥有多种原代细胞分离培养经验
2、分离培养的细胞具有很高的成活率
四、客户提供材料
1、如实验动物没有特殊要求,如转基因小鼠等。本公司可负责直接从所需实验动物分离培养出所需原代细胞。
2、关于细胞培养条件的说明:本公司提供DMEM培养基,RPIM1640培养基以及G418抗生素,如需其它培养基及筛选条件,也请客户一并提供。特殊基因请客户提供相应抗体以供检测
五、提交给客户结果
1、分离培养的稳定原代细胞株>1×107
2.相关鉴定实验报告;
3、实验报告;